عد الكريات البيض في صيغة Goryaeva الغرفة. تنزيل كتاب "Clinical Laboratory Research" (2.84Mb)

يعد تعداد الكريات البيض في غرفة Goryaev أحد طرق تحديد عددها في دم المريض. يعتمد عدد الكريات البيض على العديد من العوامل ، والتي تشمل معدل التكوين ، والعزلة من نخاع العظام ، والتدمير. تتأثر كل هذه العمليات بشكل مباشر بالعوامل الفسيولوجية. لذلك ، فإن التغيير المستمر في عدد الكريات البيض في الشخص السليمالمستطاع. يتضح هذا بشكل خاص عند مقارنة نتائج تحليلات الصباح والمساء.

طريقة لعد الكريات البيض في غرفة Goryaev

تتكون طريقة الأنبوب هذه من الخطوات التالية:

1. يتم تعبئة أنبوب الاختبار بـ 0.4 مل من حمض الأسيتيك مع صبغة الثيازين. باستخدام ماصة شعيرية ، يتم أخذ 20 ميكرولتر من الدم الطازج ونفخه في نفس الأنبوب. يتم خلط الخليط الناتج جيدًا.
2. يتم مسح صفيحة زجاجية رقيقة في الحجرة تمامًا ، وبعد ذلك تتشكل بقع قزحية.
3. بعد ذلك ، يتم أخذ قطرة من المحلول الناتج من الدم مع حمض الأسيتيك وإحضارها إلى حافة اللوحة.
4. عندما تمتلئ الحجرة ، تترك دون إزعاج لمدة دقيقة واحدة حتى تبدأ خلايا الدم البيضاء في الاستقرار.
5. عند التكبير المنخفض ، يتم حساب الكريات البيض.

للحصول على نتائج صحيحة ، يتم استخدام صيغة خاصة لحساب عدد الكريات البيض في 1 ميكرولتر من الدم. المعيار هو مؤشر من 4 إلى 9 لكل 10 لترات.

إذا تم الحصول على نتيجة تتجاوز هذه العلامة ، فسيتم تشخيص حالة المريض على أنها كثرة الكريات البيض. إذا كان هناك انخفاض - قلة الكريات البيض. لكن هذا من الناحية النظرية ، في الواقع ، تحتاج إلى إلقاء نظرة على المؤشرات الأخرى من أجل تحديد المرض بدقة.

تُستخدم ثلاثة أنواع من الصيغ لحساب عدد الكريات البيض:

• لعدد 64 مربعات فارغة

N = م × 4000 × 20 / (64 × 16) = م × 78.13 × م × 78

• لعدد 169 مربعات فارغة

N = م × 4000 × 20 / (169 × 16) ≈ م × 29.6

• لعدد 100 مربعات فارغة

N = م × 4000 × 20 / (100 × 16) ≈ م × 50.

تعد كاميرا Goryaev جهازًا يمكنه حساب عدد الكريات البيض بدقة ، بالإضافة إلى الجسيمات المماثلة الأخرى. يتكون من زجاج سميك خاص مع حجرة مستطيلة. يحتوي على شبكة مجهرية وزجاج بصري رقيق.

تم تطوير هذا الجهاز من قبل الأستاذ الشهير جورييف نيكولاي كونستانتينوفيتش ، الذي عمل في جامعة كازان. أعطت شبكته المحددة النتائج الأكثر دقة من كاميرات العلماء المشهورين الآخرين.

بالنسبة لصيانة الكاميرا ، هناك أيضًا بعض الفروق الدقيقة هنا. أثناء فترات الراحة من العمل ، يجب أن تكون غرفة Goryaev في منطقة جافة. عند اكتمال العمل ، يجب معالجته. للقيام بذلك ، يتم غمر الجهاز الإيثانول(70٪) لمدة نصف ساعة. خيار التنظيف الآخر هو محلول الفورمالين (4٪) لمدة ساعة واحدة. الخطوة الأخيرة هي شطف حجرة جورييف بالماء المقطر ومسحها بقطعة قماش ناعمة.

هناك حالات يكون فيها كل شيء على ما يرام بمعدلات منخفضة في جسم المريض. هذا يشير إلى أن الاحتياطي الرئيسي من الكريات البيض يقع في الأنسجة. في مثل هؤلاء الأشخاص ، يكون الاستعداد للإصابة بأمراض مختلفة منخفضًا جدًا ، لذلك نادرًا ما يمرضون. إنها في الأساس وراثة.

قلة الكريات البيض وزيادة عدد الكريات البيض

من الممكن أيضًا افتراض أن المريض قد تم تشخيصه بنقص الكريات البيض باستخدام كاميرا Goryaev. وهي مقسمة إلى عضوي ووظيفي.

تشمل الانحرافات الوظيفية:

• أمراض المسببات الفيروسية أو البكتيرية (الالتهابات المعوية ، التهاب الكبد A ، إلخ) ؛
• رد فعل على بعض الأدوية
• مع عبء قوي على العضلات والتوتر والنظام الغذائي ؛
• مع تخزين الدم بشكل غير صحيح.

تشمل الأسباب العضوية ما يلي:

• بانيلوفثيسيس.
• سرطان الدم؛
• مرض هودكنز؛
• مرض الروماتيزم
• تشعيع الأيونات
• ندرة المحببات.

يستجيب الجسم لكثرة الكريات البيضاء عندما تؤثر عليه عوامل داخلية وخارجية. في الممارسة العملية ، تتميز الأشكال الفسيولوجية والمرضية للأمراض.

غرف العد- أجهزة لحساب العناصر المكونة للدم والبول و السائل النخاعيوكذلك الكائنات الحية الدقيقة. عرضت على K. s. فرنسي عالم وظائف الأعضاء L. Ch.Malassez في عام 1874

ك. تمثل شريحة سميكة مع تجويف ، أسفلها نقش شبكة العد ؛ يتم وضع غطاء زجاجي مصقول فوق التجويف. ارتفاع ثابت K. مع. يتم توفيره عن طريق فرك كثيف للغطاء والشرائح حتى تشكل حلقات نيوتن قوس قزح (نطاقات التداخل).

العناصر الهيكلية لجميع أنواع الشبكات هي مربعات كبيرة وصغيرة. شبكات أنواع مختلفة- توماس ، بوركر ، بريدتشينسكي ، تورك ، نيوباور ، جورييف ، فوكس - روزنتال ، إلخ - تتميز بتجمعات مختلفة من المربعات الكبيرة والصغيرة.

تسمح لك القيم المعروفة - ارتفاع الغرفة ، ومساحة الشبكة وأقسامها ، وتخفيف الدم المأخوذ للفحص - بحساب عدد العناصر المكونة في حجم معين (1 ميكرولتر) ) من الدم (أو وسيلة أخرى).

هناك مفتوحة ومغلقة ل. في غرفة مغلقةيُفرك غطاء الغطاء بعد ملئه ، ويمكن أن تدخل فقاعات الهواء فيه. مثل K. s. (Thomas - Zeiss مع Tom mesh ، Dunger بشبكة خاصة) غير مريح للاستخدام ولا يتم استخدامه.

تمتلئ الغرف المفتوحة (الشكل 1) بعد أن يتم لف الغطاء. لديهم شبكتان على شريحة واحدة. يتم تحديد اللوحات ذات الشبكات المحفورة بواسطة أخاديد من بعضها البعض ، وكذلك من بقية الشريحة الزجاجية. يجعل وجود الأخاديد من الممكن تنظيم ملء الغرف. بعض الغرف مجهزة بمشابك معدنية تثبت الغطاء في مكانه.

مفتوح ل. ألفيروف أول من وصفه في عام 1883 ، ثم في عام 1905 بواسطة ك. بيركر. غرف العد المفتوحة في Klyucharev و Gausser و Levy و Gelber و Glaubermann معروفة. في اتحاد الجمهوريات الاشتراكية السوفياتية ، تستخدم غرف عد جورييف وفوشس روزنتال على نطاق واسع. تبلغ مساحة غرفة Goryaev مع شبكة Goryaev (الشكل 2) 0.9 ميكرولتر ، وتبلغ مساحة الشبكة 9 مم 2. تتكون الشبكة من 225 مربعًا كبيرًا ؛ 100 منها فارغة ، 25 مقسمة إلى 16 مربعًا صغيرًا ، 100 مفصولة بخطوط.

تبلغ مساحة غرفة العد Fuchs-Rosenthal مع شبكة Fuchs-Rosenthal (الشكل 3) 3.2 ميكرولتر ، ومساحة الشبكة 16 مم 2 ، وتتكون من 256 مربعًا كبيرًا (لا يتم احتساب المربعات المفصولة بخطوط).

طريقة العمل

قبل العمل على الشريحة الزجاجية. ويتم غسل الغطاء الأرضي تحت الماء الجاري ماء الصنبوروامسحها حتى تجف. ثم يُفرك زجاج الغطاء بإحكام على الغرفة (حتى تظهر الحلقات النيوتونية بقوس قزح ، لأنه في هذه الحالة فقط يكون حجم ثابت K. s).

قبل ملء الحجرة ، يتم خلط محتويات أنبوب الاختبار عدة مرات ، ثم يتم أخذ قطرة دم من أنبوب الاختبار مع الطرف الذائب لقضيب الزجاج ، وإمالته ، ووضعه على شريحة زجاجية عند حافة الزجاج. الغطاء. إذا كانت قطرة دم واحدة لا تكفي لملء K. بالكامل ، أضف قطرة أخرى. إذا تم أخذ الدم في الخلاط ، فسيتم تحرير القطرات الأولى من الشعيرات الدموية للخلاط ، و K. s. املأ بقطرة من أمبولة الخلاط. يتم إزالة السائل المتبقي من الشريحة الزجاجية باستخدام قطعة شاش. يبدأ العد بعد 3 دقائق. بعد ملء الحجرة (خلال هذا الوقت ، تستقر خلايا الدم) تحت مجهر بتكبير منخفض (الهدف X 8 ، العدسة X 10 أو X 15) ومجال رؤية مظلم (بغشاء مغطى أو مكثف منخفض قليلاً) . الخلايا الموجودة داخل المربع قابلة للعد (الشكل 4). تحسب الخلايا التي يتقاطع معها جوانب المربعات على النحو التالي: إذا كان أكثر من نصف الخلية داخل المربع ، فيحسب ، وإذا كانت بالخارج ، فلا تحسب. يتم حساب الخلايا التي تتقاطع مع خطوط في الوسط تمامًا على سطرين متجاورين ، يمين وأعلى ، من المربعات ولا يتم حسابها في الخطين الآخرين. عند استخدام محاليل التخفيف المناسبة ، يمكن حساب كريات الدم الحمراء ، وخلايا الدم البيضاء ، والصفائح الدموية ، والحمضات ، والخلايا القاعدية ، والخلايا الشبكية في غرفة غورياييف.

تُحسب كريات الدم الحمراء في 80 مربعًا صغيرًا ، أي في 5 مربعات كبيرة تقع قطريًا. يتم الحساب وفقًا للصيغة:

س = أ * 4000 * 200/80 ،

حيث a هو عدد خلايا الدم الحمراء التي يتم عدها في 80 مربعًا صغيرًا ، و 80 هو عدد المربعات الصغيرة المحسوبة ، و 200 درجة تخفيف الدم ، و 4000 هو المضاعف للحصول على محتوى خلايا الدم الحمراء في 1 ميكرولتر من الدم ( حجم المربع الصغير 1/4000 ميكرولتر). في الممارسة العملية ، يتم ضرب عدد خلايا الدم الحمراء المحسوبة في 5 مربعات كبيرة في 10000.

يتم عد الكريات البيض في 1600 مربع صغير (في 100 مربع كبير). يتم الحساب وفقًا للصيغة:

س = أ * 4000 * 20/1600 ،

حيث a هو عدد الكريات البيض المحسوبة في 1600 مربع صغير ، 1600 هو عدد المربعات الصغيرة المحسوبة ، 20 هي درجة تخفيف الدم ، 4000 هي مضاعف للحصول على محتوى الكريات البيض في 1 ميكرولتر من الدم. في الممارسة العملية ، يتم ضرب عدد الكريات البيض التي تم عدها في 1600 مربع صغير في 50.

يتم عد الصفائح الدموية في 400 مربع صغير (25 مربعًا كبيرًا على طول قطري الشبكة). يمكن أن تكون الكواشف المستخدمة في التخفيف عبارة عن محلول متساوي التوتر من كلوريد الصوديوم ، حلول مختلفة، والمحافظة على الصفائح الدموية وكريات الدم الحمراء.

يتم عد الصفائح الدموية تحت المجهر التقليدي وباستخدام جهاز تباين الطور (انظر الفحص المجهري الطوري) للتعرف عليها بشكل أكثر وضوحًا. بعد التخفيف ، يُترك الأنبوب بالدم لمدة 25-30 دقيقة. لانحلال الدم في كريات الدم الحمراء. ثم يعاد خلط محتويات أنبوب الاختبار ويملأ بـ K. مع. ، توضع to-ruyu لمدة 5 دقائق. في غرفة رطبة (مثل أطباق بتري بقطعة قطن مبللة) لترسيب الصفائح الدموية. يتم الحساب وفقًا للصيغة:

س = أ * 4000 * 200/400 ،

حيث a هو عدد الصفائح الدموية التي يتم عدها في 400 مربع صغير ، و 200 درجة تمييع الدم ، و 400 هو عدد المربعات الصغيرة المحسوبة ، و 4000 هو مضاعف للحصول على محتوى الصفائح الدموية في 1 ميكرولتر من الدم. في الممارسة العملية ، يتم ضرب عدد الصفائح الدموية التي تم عدها في 400 مربع صغير في 2000.

يتم حساب عدد الخلايا القاعدية والحمضات في غرفة Goryaev في 1600 مربع صغير ، وكذلك الكريات البيض. يتم ضرب العدد المحسوب عمليًا للخلايا القاعدية والحمضات في 50.

تُحسب الخلايا الشبكية في غرفة جورياييف في 80 مربعًا صغيرًا ، مثل كريات الدم الحمراء. يتم ضرب العدد المحسوب عمليًا للخلايا الشبكية بـ 10000.

من الأفضل تحديد العدد الإجمالي للخلايا في السائل الدماغي الشوكي (انظر) في غرفة فوكس روزنتال (بسبب قلة عدد الكريات البيض في السائل الدماغي النخاعي). عد عبر الشبكة بالكامل (256 مربعًا كبيرًا) تحت مجهر تكبير منخفض (العدسة × 15 ، موضوعي × 8).

جدا بأعداد كبيرةالخلايا ، يُسمح بحساب نصف الشبكة (مع مضاعفة النتيجة اللاحقة بمقدار 2). يتم الحساب وفقًا للصيغة:

X \ u003d a * 11 / 3.2 * 10 ،

حيث a هو عدد الخلايا المحسوبة في 256 مربعًا ، 11/10 درجة التخفيف ، 3.2 حجم الغرفة في ميكرولتر. في الممارسة العملية ، عند العد في غرفة Fuchs-Rosenthal ، يتم تقسيم عدد الكريات البيض على 3.

في غرفة Goryaev ، يتم حساب خلايا السائل النخاعي على الأقل 3 مرات (أيضًا المنطقة بأكملها) ، في كل مرة تملأ الغرفة من جديد ، ثم يتم أخذ المتوسط ​​الحسابي. يتم الحساب وفقًا للصيغة:

س \ u003d أ * 11 / 0.9 * 10 ،

حيث a هو المتوسط ​​الحسابي لعدد الخلايا المحسوبة على الشبكة بأكملها ، 11/10 هي درجة التخفيف ، 0.9 هو حجم الغرفة بالميكرولتر. في الممارسة العملية ، يتم ضرب عدد الكريات البيض التي تم عدها في 1.2.

يتم إجراء التحديد الكمي للعناصر المتكونة في البول في غرف Fuchs-Rosenthal و Goryaev: حساب كريات الدم الحمراء وكريات الدم البيضاء بمعدل تكبير مجهر متوسط ​​، عد الأسطوانات عند مستوى منخفض. تعتمد درجة تمييع البول على طريقة الدراسة (انظر البول).

العد في K. s. ليس دقيقًا تمامًا. خطأ الطريقة من 10 إلى 20٪ حسب عدد العناصر المحسوبة.

العناية وظروف التخزين

حماية الغرف من الأوساخ والغبار على الشبكة. بعد العمل ، يتم غسل الكاميرا والغطاء تحت ماء الصنبور الجاري ومسحهما بعناية ولكن جيدًا بقطعة قماش نظيفة (يمكن استخدام الشاش). ثم لفها بالورق وضعها في صندوق.

فهرس:كتيب طرق البحث المخبري الإكلينيكي ، أد. إي.أ.كوست ، ص. 22 ، م ، 1975.

D. N. Ishmukhametov

مل. في أنابيب الاختبار vidalevsky مع ماصة

عند إضافة 0.02 مل من الدم إلى 0.4 مل من حمض الأسيتيك ، يتم الحصول على تخفيف 20 مرة ، وهو أمر ضروري لحساب عدد الكريات البيض.

لحساب العناصر المكونة ، يتم وضع الدم المخفف في غرفة العد حيث يتم ترتيب الخلايا في طبقة واحدة. معرفة حجم الحجرة وتخفيف الدم ، وحساب عدد العناصر المكونة في 1 لتر من الدم.

جهاز الكاميرا والشبكة جورييف. حجرة Goryaev (الشكل 37) عبارة عن شريحة زجاجية سميكة مقطوعة بأربعة أخاديد عرضية. تقسم الأخاديد الزجاج إلى ألواح - جانبان ومتوسطان. الصفيحة الوسطى أقل بـ 0.1 مم من الألواح الجانبية. وهي مقسمة بواسطة أخدود عرضي إلى جزئين متساويين. يتم تطبيق شبكة جورييف على كل نصف من اللوحة الوسطى.

ملحق الكاميرا عبارة عن غطاء زجاجي أرضي. يجب أن يتم تطبيقه بحيث يغطي كلا من الألواح الجانبية والوسطى. عن طريق الضغط على حواف الزجاج بإبهامك ، يتم فركه على الألواح الجانبية حتى تظهر حلقات قزحية اللون (حلقات نيوتن).

نظرًا لأن الألواح الجانبية أعلى من المتوسط ​​، فلا تزال هناك فجوة بينها وبين الغطاء. هذه هي الكاميرا في ShchSh

مليئة بالدم المخفف. عمق الغرفة 0.1 مم.

شبكة جورييف المطبقة على قاع الحجرة مربعة الشكل. جانبها 3 مم ومساحتها 9 مم 2. تنقسم الشبكة إلى 225 مربعًا كبيرًا - 15 مربعًا أفقيًا و 15 مربعًا رأسيًا. جزء من المربعات الكبيرة (بعد اثنين إلى الثالث) مقسم إلى 16 مربعًا صغيرًا. جانب المربع الصغير 1/20 مم (الشكل 38).

تقنية العد. يضمن الملء الصحيح لغرفة العد بالدم المخفف دقة عد العناصر الموحدة. قبل ملء الحجرة ، يتم خلط محتويات أنبوب الاختبار عن طريق تدويره بين راحة اليد لمدة دقيقتين. يتم تطبيق الدم المخفف على اللوحة الوسطى للغرفة باستخدام ماصة باستور ببالون أو قضيب زجاجي ، ووضعه بالقرب من حافة الغطاء. وفقًا لقانون الشعيرات الدموية ، يتدفق السائل تحت الزجاج ، ويملأ الغرفة.

بعد الملء ، يجب وضع الحجرة على الطاولة لمدة 2-3 دقائق ، حتى تتوقف حركة السائل فيها وتستقر الخلايا بلا حراك على خلفية مربعات الشبكة. عند ملء الحجرة ، يجب ألا يصب السائل في الأخاديد. يجب ألا تدخل فقاعات الهواء الغرفة.

يتم العد تحت مجهر منخفض التكبير (المجلد 8 ، حوالي 10 أو 15) ، يجب خفض المكثف وإغلاق الحجاب الحاجز.

تُحسب كريات الدم الحمراء في 5 مربعات كبيرة من شبكة جورييف ، مقسمة إلى 16 مربعًا صغيرًا ومرتبة قطريًا. الشرط الأخير يرجع إلى حقيقة أن العناصر المشكلة لا يتم توزيعها بشكل موحد تمامًا على الشبكة ، ويجب حسابها في أقسامها المختلفة.

يتم إجراء تعداد الكريات البيض في 100 مربع كبير غير مقسم موجود في جميع أنحاء الشبكة في مجموعات من أربعة.

من أجل عدم مضاعفة حساب نفس الخلايا الموجودة على خطوط الحدود ، يجب على المرء أن يلاحظ القواعد التالية: خلايا تنتمي إلى هذا المربع ، والتي تقع داخلها نصفها الأكبر ؛ يتم حساب الخلايا المقسومة بخط حد إلى النصف فقط على الحدود العلوية واليسرى للمربع ؛ الخلايا الكاذبة في معظمها بالخارج مربع معينلا تعول على الإطلاق.

بعد حساب كريات الدم الحمراء في الغرفة ، يتم تحديد عددها في 1 ميكرولتر من الدم. للقيام بذلك ، يتم ضرب عدد خلايا الدم الحمراء التي تم الحصول عليها عن طريق العد في 10000. تم الحصول على هذا المعامل من خلال الحساب التالي: 1 مربع كبير من الشبكة يحتوي على 16 مربعًا صغيرًا ، و 5 مربعات كبيرة - 80 مربعًا صغيرًا (16-5) ). جانب مربع صغير

تساوي "/ th mm ، ومساحتها" / u - "/ 20 =" / "o mm2. ارتفاع ^ الغرفة "/ ش مم ، وبالتالي فإن حجم الدم فوق المربع الصغير هو:

1 1 1 z 400 "l0 4000 مم

يساوي. كما هو موضح ، حجم الدم فوق المربع الصغير

يساوي - مم 3 ، لذلك ، من أجل معرفة عدد كريات الدم الحمراء في 1 ميكرولتر ، أي في حجم أكبر 4000 مرة ، من الضروري مضاعفة عدد كريات الدم الحمراء الموجودة في مربع صغير واحد ^ في 4000.

تم تخفيف الدم لعد كرات الدم الحمراء 200 مرة. لمعرفة عدد خلايا الدم الحمراء في الدم الكامل ، يتم ضرب الجزء الناتج بالتخفيف:

يمكن أن يكون هذا التعبير الرياضي pre80

ضع في شكل عوامل:

يتكون العامل الكسري من قيم ثابتة. عندما يتم عدها ، يتم الحصول على 10000 ويتخذ التعبير الكامل الشكل التالي: أ -10.000. لذا ، فإن عدد كريات الدم الحمراء في 1 ميكرولتر من الدم يساوي عدد كريات الدم الحمراء التي يتم عدها في خمسة مربعات كبيرة من شبكة جورييف ، مضروبًا بمقدار 10000.

على سبيل المثال: تم إحصاء 427 خلية حمراء في 5 مربعات كبيرة من شبكة جورييف. في 1 ميكرولتر من الدم ، سيكون عدد كريات الدم الحمراء 427-10000 = 4.270.000 ، أو 4.27-106.

من أجل تحديد محتوى خلايا الدم الحمراء في 1 لتر من الدم ، تحتاج إلى مضاعفة عدد خلايا الدم الحمراء ، معبراً عنها بالملايين ، في 10. في مثالنا ، عدد خلايا الدم الحمراء في 1 لتر من الدم هو 4 ،