Човешка кръв под микроскоп. Микроскопия в различни области на приложение

Признаци на бременност след имплантиране на ембрион

Значението на науката в живота на цялото общество е много трудно да се отрече. Учените и техните разработки са дали на обществото всичко, което сега използва и се наслаждава с радост. Разработките на учени в различни области позволяват да се победят смъртоносните болести и да се борят психични разстройства, създават уникално „умно“ оборудване и дори роботи. Възможностите на науката са наистина безкрайни. Новите лица винаги носят нови идеи със себе си, които стават основа за бъдещо развитие. Въпреки това, много разработки се основават на прости и доказани методи.

Мишките бяха рандомизирани на групи. Три до шест повторения бяха събрани на експериментална група. Степента на чистота е 3%-7%. За оцветяване с вътреклетъчни цитокини клетките се стимулират в продължение на 5 часа с фалбол ацетат миристат и йономицин в присъствието на брефелдин А за последните 4 часа. За оцветяване с цитокини клетките се стимулират в продължение на 4 часа с фромбол миристат ацетат и йономицин в присъствието на брефелдин А за последните 2 часа.

След това клетките бяха фиксирани и пермеабилизирани съгласно инструкциите на производителя. Фиксирането и оцветяването се извършват съгласно инструкциите на производителя. Всички инжекции бяха извършени при липса на анестезия и аналгезия и мишките бяха незабавно върнати в домашните им клетки според процедурата. Ежегодно се наблюдава хуманното отношение към опитните животни. По време на тези експерименти не са наблюдавани неочаквани неблагоприятни събития.

Много мъдреци от миналото са казали, че има макро- и микросвят. На този етап на развитие хората не можеха да разберат цялата дълбочина на тези думи. В крайна сметка макро- и микросветовете наистина съществуват и си взаимодействат много тясно. Могат да бъдат причинени малки промени в клетъчната структура глобални промени V слънчева система. Днес е много трудно да се докаже или отхвърли такава връзка, но изследванията на света на бактериите и клетките показват, че клетката е малка Вселена.

Имунофлуоресцентно оцветяване и конфокална микроскопия. Т. и замразени в пари на течен азот. Изображенията са заснети чрез конфокална микроскопия. Статистическата значимост беше оценена с помощта на теста на Mann-Whitney. Сдвоените данни бяха анализирани с помощта на двустранен сдвоен t тест. Експериментите с Moire бяха проведени в съответствие със съответния проект на Министерството на вътрешните работи и лични лицензи след институционално етично одобрение. Беше получено информирано съгласие от всички участници и проучването беше одобрено от Националния комитет по етика на научните изследвания.

Микроскопия

Микроскопията е наука за използването на микроскоп. В превод от гръцки тази дума означава „малък, малък“. Микроскопията може да бъде разделена на няколко подвида: оптична, многофотонна, рентгенова, лазерна и електронна. Целта на този метод на изследване е засилено наблюдение на обекта и регистриране на забелязаните промени.

Конфликт на интереси: Авторите декларират липса на конфликт на интереси. Нивата на кръвната захар се контролират строго от координираното действие на поне четири вида клетки, които изграждат островите на панкреаса. Освен това, това проучване показа, че делта клетките специфично експресират рецептори, които получават и координират системни сигнали от сигналните пътища на лептин, грелин и допамин, което ги предполага като интегратори на централни и периферни метаболитни сигнали в острова на панкреаса.

История на микроскопа

В началото на неговата историческо развитиемикроскопите са тези, които използват видими светлинни лъчи. Такива инструменти бяха много слаби за наблюдение и бяха подходящи само за прости операции. Идеята за електронен микроскоп възниква в момента, когато учените се замислиха да заменят електромагнитното излъчване с електронен лъч. Това събитие стана отправна точка за развитието на електронния микроскоп, който значително разшири възможностите за наблюдение на обект.

В обобщение, това проучване идентифицира ключови характеристики на клетъчния тип на острата функция на панкреаса и предоставя критичен ресурс за цялостно разбиране на биологията на островчетата и патогенезата на диабета. Лангерхансовите острови на панкреаса са групи от поне четири различни видовеендокринни клетки, които секретират хормони, които произвеждат координирани, но различни реакции за поддържане на глюкозната хомеостаза. По този начин те заемат централно място в патофизиологията на диабета.

Микроскопски методи

За да се изследва правилно и задълбочено всеки обект, е необходимо да се работи по определен алгоритъм. Такива алгоритми се разработват веднъж и се използват с години. За да уча света около насизползвайки специално оборудване, е необходимо да се овладеят специални методи. Методите за микроскопия са набор от различни алгоритми, следвайки които можете задълбочено и систематично да изучавате конкретен обект на микросвета. Преминаването на светлинен лъч през микроскоп е придружено от някои промени в първоначалните характеристики, които могат да бъдат причинени от структурната структура на обекта. Този процес може да бъде придружен от редица оптични ефекти, като отражение, абсорбция, пречупване, дисперсия и др.

Съставът на човешките индивиди не е нито хомогенен, нито статичен, но варира между отделните индивиди и в различните области на панкреаса. Клетъчната хетерогенност усложнява молекулярните изследвания на цели човешки островчета и може да маскира важни роли за по-малко изобилни клетки в популацията. Освен това, това усложнява усилията за идентифициране на епигенетични и транскрипционни сигнатури, които разграничават диабетните от недиабетните островчета, което води до непоследователни доклади за влияния на гени и пътеки.

Конвенционалните методи за сортиране и обогатяване не са в състояние да пречистят специфично всеки тип островна клетка, така че липсва точно разбиране на транскрипционния репертоар, който определя идентичността и функцията на всеки тип клетка. От тези профили ние идентифицирахме транскрипти, уникално важни за всяка идентичност и функция на всеки тип островни клетки. Данните и прозренията от това проучване предоставят важна основа за насочване на бъдещи проучвания, базирани на генома, за дисфункция на островчета и диабет.

Методи на светлинна микроскопия

Светлинната микроскопия е система от техники, които използват различни оптични ефекти за надеждно показване на резултатите. Видимите елементи и естеството на полученото изображение до голяма степен ще зависят от осветлението. Общо има голям бройметоди на микроскопия: светло поле, косо осветяване, интерферентен контраст, тъмно поле, поляризационен метод, фазов контраст, ултравиолетова, флуоресцентна, инфрачервена микроскопия, конфокален микроскоп.

Амбърните едноклетъчни транскриптоми тясно рекапитулират тези на непокътнати островчета

Панкреатични островчета са получени от осем човешки донори на трупни органи. Транскриптомите са групирани по донор, а не по състояние на лечение или време на инкубация, което силно показва, че лечението с островчета не променя значително транскриптомите на островчетата.

Едноклетъчните транскриптоми отразяват тези сдвоени непокътнати острови. Диаграма на експериментален работен процес. След това оценихме степента, до която останалите 978 едноверижни транскриптоми представляват моделите на експресия, наблюдавани в непокътнати островчета. Тези резултати показват, че островните едноклетъчни транскриптоми са с високо качество и ефективно отразяват масовите островни транскриптоми.

Всички тези методи имат определени предимства и недостатъци. Когато работите с извадка, трябва да изберете един или друг метод въз основа на неговата адекватност в дадена ситуация. Силен и слабостина всеки метод като цяло не са важни, основното е методът да е приложим при дадените условия.

Микроскопия и медицина

Използването на микроскопията в медицината има огромен потенциал. Днес, благодарение на микроскопите, е възможно да се изследват различни клетки на човешкото тяло, за да се определи точно здравословното състояние. Клетките на тялото дават най-точния и надежден резултат, който доскоро беше невъзможно да се получи, тъй като микроскопите не можеха да предоставят изчерпателна информация.

Профилирането с едно отделение улавя транскриптомите на основни и второстепенни видове ендокринни и екзокринни клетки на панкреаса. Панкреасът също така съдържа три вида екзокринни клетки: ацинарни, звездовидни и протонни, които критично подпомагат храносмилането чрез синтезиране и транспортиране на храносмилателни ензими. Използвахме тези маркерни гени, за да определим представянето на всеки тип островни клетки сред нашите 978 профилирани отделни клетки.

По този начин, антителата срещу други потенциални маркери на клетъчната повърхност, които сме идентифицирали, могат да бъдат полезни за пречистване на други видове островни клетки. Профилирането на единичен елемент идентифицира неочаквано припокриване в експресията между малките и главните типове островни клетки. Техники за клетъчно сортиране и обогатяване, като флуоресцентно активирано клетъчно сортиране, са използвани за идентифициране на характерни алфа и бета клетъчни гени.

Използването на такива устройства е много обещаващо, тъй като методите за лечение и диагностика могат драматично да се променят и да преминат на ново ниво. Известни и използвани са изследвания с помощта на микроскопи дълго време, обаче, науката е на прага да лекува хората с клетки. това уникална възможност, което ще ви позволи да се отдалечите от обичайните методи на лечение и да забравите за лекарствата. Клетката е най-мощният елемент на тялото. Просто е безсмислено да говорим какви ползи може да донесе трансплантацията на здрави клетки на болен човек, защото това е очевидно.

Гените, лежащи в основата на метаболитната функция, регулирането на енергийната хомеостаза и ситостта, са специфични за различните видове островни клетки. Бета клетките регулират нивата на кръвната захар чрез секрецията на инсулин и по този начин са изключително чувствителни към нивата на кръвната захар.

Стимулираната от глюкоза инсулинова секреция е свързана с универсални основни клетъчни метаболитни пътища в бета клетките. Специфична за клетъчния тип метаболитна, сигнална и диабетна генна експресия. Бета клетъчна експресия на различни изоформи на гликолитични и метаболитни междинни совалки.

Изследване на урина

Общият анализ на урината е набор от мерки, които са насочени към изследване на свойствата на урината и нейния физикохимичен състав. Важни показатели в този случай са цвят, мирис, реакция, прозрачност, плътност, както и съдържание в урината различни вещества. Микроскопията на утайката на урината ви позволява да определите наличието на соли, клетъчни елементи и отливки. Трябва да се разбере, че урината е крайният продукт на бъбречната дейност, който може много точно да отразява състоянието на метаболитните процеси и кръвта в тялото.

По този начин нашите данни предполагат интригуващи роли на островните делта клетки в интегрирането на метаболитни сигнали чрез сигналните пътища на лептин, грелин и допамин. Едноклетъчните транскриптоми свързват редки и често срещани гени за генетичен риск от диабет с типовете островни клетки. Ние също така изследвахме моделите на експресия на клетъчния тип на 536 гена, които определят локусите на количествени черти. Сто петдесет и девет допълнителни гена не показват по-голяма или равна на четирикратна промяна в експресията в който и да е тип ендокринни островни клетки.

Анализ на утайката на урината

Микроскопията на урината ви позволява да създадете по-пълна картина на пълно изследване на тялото. Също така цитонамазката често се използва за рутинна и диференциална диагноза на заболявания на пикочните пътища и бъбреците. По време на лечението може да се назначи микроскопия на урината, за да се оцени ефективността на намесата на лекаря. Изследването на урината ни позволява да идентифицираме специфични или потенциални проблеми във водния и електролитния баланс на тялото, както и в метаболитния процес. Анализът на урината е много ефективен при диагностицирането на заболявания стомашно-чревния тракт, както и по време на инфекциозни и възпалителни процеси в организма. Понякога микроскопията на урината се използва за наблюдение на състоянието на пациента по време на медицинско или хирургично лечение.

Последните проучвания показват особености на дедиференциацията на бета клетките при диабет и стресови условия. Последните проучвания върху едноклетъчния остров възникват, когато се изучават изследвания. Степента на валидиране за делта клетките беше значително по-ниска, вероятно поради сравнително малкия брой клетки, профилирани за сравнение. В допълнение, тези подходи затрудняват откриването на експресията и промените в експресията на транскрипти с ниско изобилие. Въпреки тези ограничения, ние наблюдавахме силни корелации между транскрипти от сдвоени обемни островчета и единични клетки, което предполага, че те представляват висококачествени и представителни набори от данни.

Изследване на кръвта под микроскоп

Кръвните клетки се образуват в червения костен мозък и след това се освобождават в кръвния поток. Всеки изпълнява своята специфична функция. Левкоцитите са необходими за борба с инфекциозните клетки, червените кръвни клетки помагат за обогатяването на клетките с кислород и премахването на въглеродния диоксид от тях, тромбоцитите са много важни за хемостазата. При нормални условия човешкото тяло произвежда нормативен смисълна всички клетки, което не надхвърля определени граници. Ако възникнат някакви усложнения или се появи заболяване, кръвните клетки могат да променят своя размер, форма, цвят и брой. Само чрез прецизно микроскопско изследване може да се определи състоянието на клетките и да се направят съответните заключения.

Въз основа на едноклетъчни профили на транскриптоми, ние идентифицирахме клетки от всеки ендокринен и екзокринен тип в агностичния панкреас и манипулирахме данните. Този подход идентифицира експресионните сигнатури на всеки тип клетка с прецизност на една клетка. Тези данни предполагат дисфункция на делта клетки, в допълнение към дисфункция на бета клетки, като потенциални допринасящи фактори за развитието на моногенни диабетни разстройства.

Това ясно изисква допълнителна работаза по-добро разбиране на регулацията и функцията на тези клетки при нормални и диабетни състояния. Нови маркери на клетъчната повърхност, идентифицирани за всеки от тези типове клетки, могат да бъдат използвани за конкретно обогатяване и пречистване на тези популации за подробни функционален анализ.

Кръвта е животворната течност на тялото, която осигурява обмяната полезни веществамежду всички клетки. Микроскопията на кръвната натривка е изследване, което се извършва под микроскоп. Изследваното лекарство се приготвя от една капка кръв. Тази процедура е включена в общия кръвен тест или левкоцитната формула и не се извършва отделно.

Придобиване, обработка и дисоциация на островчета

Тази разлика не беше толкова изразена, колкото в предишните доклади, вероятно поради сравнително скромния брой клетки, взети за всеки индивид. Двадесет и четири часа след прехвърлянето, приблизително 500 островни еквивалента се разделят на аликвоти и се центрофугират при 180 g за 3 минути при стайна температура. Общо времелечението и манипулирането за всеки остров е ≤60 min. Използвани са до два микрофлуидни чипа на островче за всяка формулировка.

Последователност, картографиране на четене и контрол на качеството

Обработка на една клетка и качествено филтриране

Класификация на видовете острови. От многото аспекти на алтернативната медицина един от най-странните е анализът на живи кръвни клетки. Този неоторизиран кръвен тест може да показва хранителни дефицити и други неясни състояния.

Микроскопия на цитонамазка

Защо е необходима кръвна цитонамазка? Микроскопията на кръвна натривка дава на специалиста много важна информация за състоянието на човешкото здраве. С помощта на този анализ можете да определите количественото съотношение на червените кръвни клетки, тромбоцитите, левкоцитите, както и тяхната форма и размер. В допълнение, той позволява да се определи количествената експресия на незрели левкоцити, което е много важен моментпри редица заболявания. Също така, кръвната намазка ви позволява да диагностицирате качествено заболявания, които могат да бъдат свързани с нарушения на кръвните функции, нейното образуване, коагулация и разрушаване. Много важна задача на микроскопската кръвна намазка е редовното наблюдение на състоянието на кръвните клетки, тяхната зрялост след лъче- и химиотерапия, както и при проблеми с хемоглобина, както и при левкемия.

Вземете един прост научен фактили термин, изградете сложна фантазия върху него, натиснете го и имате псевдонаука. Пример за това е анализът на жива кръв с помощта на тъмна микроскопия. Това звучи като легитимна и ценна диагностична процедура, основана на доказателства; не е.

Микроскопията с тъмно поле е микроскопска техника, при която светлината попада върху наблюдавания материал отстрани, а не отдолу или през материала. Фонът е тъмен, като наблюдаваният материал е подчертан от страничен източник на светлина. При конвенционалната ярка микроскопия фонът е бял или много светъл и материалът обикновено е оцветен тъмен цвятда получите малки детайлии цветове, които обикновено не се виждат.

Кръвна намазка се предписва, ако общият кръвен тест показва, че количествената експресия на левкоцити, незрели или атипични клетки е повишена. За намазка можете да използвате биоматериал от кръв или капиляри.

Биология и микроскопи

Биологията значително разширява възможностите за използване на микроскопи. Както споменахме по-рано, цитологията разчита до голяма степен на модерни и мощни микроскопи. Микроскопията в биологията отваря безпрецедентен обхват за експерименти и изследвания за учените. Съвременните разработки ни позволяват да говорим сега какво бъдеще ни очаква.

В медицината най-често използваната ярка микроскопия е за диагностични цели. Рутинна пълна кръвна картина често се извършва отчасти върху оцветени петна от кръвта на пациента, наблюдавани под ярка микроскопия. С тази техника учен от клинична лаборатория може да наблюдава много фини детайли за размера и формата на червените кръвни клетки; форма, размер и относителен брой на левкоцитите; и наличието или отсъствието на тромбоцити, тези малки клетъчни фрагменти, които причиняват сгъстяване на кръвта.

Полевата микроскопия е полезна в медицинската лаборатория за идентифициране на живи спирохети, събрани от заразен пациент. Това са подобни на тирбушон бактерии, които могат да се видят как се движат и изтласкват през течността или материала, в който са суспендирани. Тъй като тъмното поле по дефиниция е тъмно, повечето от детайлите, които са очевидни, когато се разглеждат ярко, са невидими. Използването на тъмни техники при изследване на жива кръв за клетъчна форма и детайли е подозрително и не се предлага от повечето реномирани медицински лаборатории, тъй като има малка диагностична стойност.

Микроскопията в биологията има много широко приложение. Устройствата позволяват да се изследват организми, които са недостъпни за човешкото око, но са много важни за научни експерименти. В биологията най-често използваният метод е електронната микроскопия, която създава изображение поради насочен поток от електрони. Освен това дори светлинният микроскоп позволява да се изследват живи биологични обекти.

Методът на микроскопията се използва много активно в биологията, тъй като почти всички разновидности са приложими за биологични изследвания. Интерференционната микроскопия ви позволява да изследвате и изучавате прозрачни течности и предмети. Това е възможно поради факта, че светлинният лъч, преминаващ през устройството, е раздвоен: една част от него преминава през обекта, а другата преминава. Така двата лъча се намесват и комбинират, за да създадат цялостно изображение.

Микроскопия в различни области на приложение

Обхватът на микроскопията е много широк. Въпреки факта, че първоначално микроскопите са били предназначени за изследвания в областта на биологията, днес тяхната сфера на влияние се е разширила значително. Микроскопията е набор от методи, намерили своето приложение в анализа на твърди и кристални тела, структурата и структурата на повърхностите. Микроскопите също се използват активно в медицината не само за диагностика, но и за извършване на микрохирургични операции. Освен това е известно, че учените са разработили подводен лазерен микроскоп, чиято цел е да търси извънземен живот в Европа.

Не бива да забравяме и бурното развитие на нанотехнологиите, което е немислимо без микроскопи. Развитието на тази индустрия води до факта, че видовете микроустройства непрекъснато се подобряват. Освен това се появяват нови, които са предназначени да изучават конкретна среда.

Обобщавайки, трябва да се каже, че микроскопията е обещаваща област, която се развива все по-активно всяка година. Интересът към човешките стволови клетки, както и развитието на нанотехнологиите, водят до факта, че микроскопите стават неразделна част от всяка изследователска работа.

Общият клиничен кръвен тест е най-често срещаният диагностичен тест, който лекарят предписва на пациент. През последните десетилетия технологията на това рутинно, но много информативно изследване направи колосален скок - стана автоматично. На помощ на лекаря по лабораторна диагностика се притекоха високотехнологични автоматични хематологични анализатори, чийто инструмент за работа беше обикновен светлинен микроскоп.

В тази публикация ще ви разкажем какво точно се случва вътре в „умната машина“, която вижда направо през кръвта ни, и защо трябва да й се доверите. Ще разгледаме физиката на процесите, използвайки примера хематологичен анализатор UniCel DxH800глобална марка Beckman Coulter. Именно на това оборудване се извършват изследвания, поръчани от службата за лабораторна диагностика LAB4U.RU. Но за да разберем технологията за автоматизирани кръвни тестове, ще разгледаме какво са видели лабораторните техници под микроскопа и как са интерпретирали тази информация.

Параметри на кръвния тест

И така, в кръвта има три вида клетки:
  • левкоцити, които осигуряват имунна защита;
  • тромбоцити, отговорни за съсирването на кръвта;
  • червените кръвни клетки, които пренасят кислород и въглероден диоксид.
Тези клетки се намират в кръвта в много специфични количества. Те се определят от възрастта и здравословното състояние на лицето. В зависимост от условията, в които се намира тялото, костният мозък произвежда толкова клетки, колкото тялото изисква. Следователно, знаейки количеството определен типкръвните клетки и тяхната форма, размер и други качествени характеристики, може уверено да се съди за състоянието и текущите нужди на организма. Това са основните параметри - брой клетки от всеки тип, техните външен види качествени характеристики– направете общ клиничен кръвен тест.


При провеждане общ анализкръвна картина броя на червените кръвни клетки, тромбоцитите и левкоцитите. По-сложно е с левкоцитите: има няколко вида от тях и всеки тип изпълнява своя собствена функция. Изберете 5 различни видовелевкоцити:
  1. неутрофили, които основно неутрализират бактериите;
  2. еозинофили, неутрализиращи имунни комплекси антиген-антитяло;
  3. базофили, участващи в алергични реакции;
  4. моноцитите са основните макрофаги и утилизатори;
  5. лимфоцити, които осигуряват общ и локален имунитет.
От своя страна неутрофилите според степента на зрялост се разделят на:
  • намушкам,
  • сегментиран,
  • миелоцити,
  • метамиелоцити.
Процентът на всеки вид левкоцити в общия им обем се нарича левкоцитна формула, която има важна диагностична стойност. Например, колкото по-изразен е бактериалният възпалителен процес, толкова повече неутрофили са в левкоцитната формула. Наличието на неутрофили с различна степен на зрялост показва тежестта на бактериалната инфекция. Колкото по-остър е процесът, толкова повече лентови неутрофили има в кръвта. Появата на метамиелоцити и миелоцити в кръвта показва изключително тежка бактериална инфекция. Вирусните заболявания се характеризират с повишаване на лимфоцитите, а при алергичните реакции - с повишаване на еозинофилите.

Освен количествените показатели изключително важна е клетъчната морфология. Промяната в обичайната им форма и размер също показва наличието на определени патологични процеси в организма.

Важен и най-известен показател е количеството хемоглобин в кръвта - сложен протеин, който осигурява доставянето на кислород в тъканите и отстраняването на въглероден диоксид. концентрация на хемоглобин в кръвта - основен показателпри диагностициране на анемия.

Друг важен параметър е скоростта на утаяване на еритроцитите (СУЕ). По време на възпалителни процеси червените кръвни клетки са склонни да се слепват, образувайки малки съсиреци. Имайки по-голяма маса, слепналите червени кръвни клетки се утаяват по-бързо под въздействието на гравитацията, отколкото единичните клетки. Изменението на скоростта им на утаяване в mm/h е прост индикаторвъзпалителни процеси в организма.

Как беше: скарификатор, епруветки и микроскоп

Вземане на кръв



Нека си спомним как се даряваше кръв: болезнено пробиване на подложката със скарификатор, безкрайни стъклени тръби, в които се събираха ценни капки изцедена кръв. Как един лаборант очерта едно парче стъкло върху друго, където имаше капка кръв, надраскайки число върху стъклото с обикновен молив. И безкрайни епруветки с различни течности. Сега вече изглежда като някаква алхимия.

Взета е кръв от безименен пръст, за което имаше доста сериозни причини: анатомията на този пръст е такава, че нараняването му представлява минимална заплаха от сепсис в случай на инфекция на раната. Вземането на кръв от вената се смяташе за много по-опасно. Затова изследването на венозна кръв не е рутинно, а се предписва при необходимост и то предимно в болниците.

Струва си да се отбележи, че още на етапа на вземане на проби започнаха значителни грешки. Например, различната дебелина на кожата дава различна дълбочина на инжектиране на тъканна течност, попаднала в епруветката заедно с кръвта - оттук и промяната в концентрацията на кръвта, освен това при натиск върху пръста кръвните клетки могат да бъдат унищожени.

Помните ли редицата епруветки, където е поставена кръвта, взета от пръста ви? Да брои различни клеткинаистина бяха необходими различни епруветки. За еритроцити - с физиологичен разтвор, за левкоцити - с разтвор на оцетна киселина, където еритроцитите са разтворени, за определяне на хемоглобин - с разтвор на солна киселина. Имаше отделен капиляр за определяне на ESR. И на последния етап беше направено намазка върху стъклото за последващо изчисление левкоцитна формула.

Кръвен тест под микроскоп

За преброяване на клетки под микроскоп в лабораторна практика, специално оптичен инструмент, предложен още през 19 век от руски лекар, на когото това устройство е кръстено - камерата на Горяев. Той дава възможност да се определи броят на клетките в даден микрообем течност и представлява дебело предметно стъкло с правоъгълна вдлъбнатина (камера). Върху него е поставена микроскопична мрежа. Горната част на камерата на Горяев беше покрита с тънко покривно стъкло.

Тази мрежа се състоеше от 225 големи квадрата, 25 от които бяха разделени на 16 малки квадрата. Червените кръвни клетки се преброяват в малки набраздени квадратчета, разположени диагонално в камерата на Горяев. Освен това имаше определено правило за преброяване на клетките, които лежат на границата на квадрата. Броят на червените кръвни клетки на литър кръв се изчислява с помощта на формула, базирана на разреждането на кръвта и броя на квадратите в решетката. След математически съкращения беше достатъчно изчисленият брой клетки в камерата да се умножи по 10 на 12-та степен и да се въведе във формуляра за анализ.

Тук бяха преброени левкоцитите, но бяха използвани по-големи квадратчета, тъй като левкоцитите са хиляда пъти по-големи от червените кръвни клетки. След преброяване на левкоцитите броят им се умножава по 10 на 9-та степен и се въвежда във формуляра. Опитен лабораторен техник отне средно 3-5 минути, за да преброи клетките.

Методите за преброяване на тромбоцитите в камерата на Горяев бяха много трудоемки поради малкия размер на този тип клетки. Техният брой трябваше да се определи само на базата на оцветена кръвна натривка, а самият процес също беше много трудоемък. Следователно, като правило, броят на тромбоцитите се изчислява само по специално искане на лекаря.

Левкоцитна формула, тоест процентният състав на всеки тип левкоцити в общия им брой може да се определи само от лекар - въз основа на резултатите от изследване на кръвни петна върху очила.



Визуално идентифициране на тези в зрителното поле различни видовелевкоцитите според формата на ядрото им, лекарят преброи клетките от всеки тип и общия им брой. След като преброи общо 100, той получи необходимото процентвсеки тип клетка. За опростяване на броенето бяха използвани специални броячи с отделни ключове за всеки тип клетка.

Трябва да се отбележи, че такъв важен параметър като хемоглобина се определя визуално (!) от лаборант по цвета на хемолизираната кръв в епруветка с солна киселина. Методът се основава на превръщането на хемоглобина в хематин хидрохлорид кафяво, чийто интензитет на цвета е пропорционален на съдържанието на хемоглобин. Полученият разтвор на хематин хидрохлорид се разрежда с вода до цвета на стандарта, съответстващ на известната концентрация на хемоглобин. Като цяло миналия век

Как стана: вакуумни контейнери и хематологични анализатори

Нека започнем с факта, че технологията за вземане на кръвни проби вече е напълно променена. Скарификаторите и стъклените капиляри с епруветки са заменени с вакуумни контейнери. Използваните сега системи за вземане на кръвни проби са нискотравматични, процесът е напълно унифициран, което значително намалява процента на грешки на този етап. Вакуумните епруветки, съдържащи консерванти и антикоагуланти, позволяват кръвта да се съхранява и транспортира от мястото на вземане до лабораторията. Това е благодарение на външния вид нова технологияСтана възможно да се правят тестове възможно най-удобно - по всяко време и навсякъде.



На пръв поглед изглежда невъзможно да се автоматизира такъв сложен процес като идентифицирането и преброяването на кръвните клетки. Но, както обикновено, всичко гениално е просто. Автоматичното кръвно изследване се основава на фундаментални физични закони. Технологията за автоматично броене на клетки е патентована през 1953 г. от американците Джоузеф и Уолъс Култър. Именно тяхното име е в името на световната марка хематологично оборудване Beckman&Coulter.

Броене на клетки

Методът на апертурния импеданс (метод на Coulter или кондуктометричен метод) се основава на преброяване на броя и оценка на естеството на импулсите, които възникват, когато клетката преминава през отвор с малък диаметър (апертура), от двете страни на който са разположени два електрода. Когато клетката преминава през канал, пълен с електролит, съпротивлението се увеличава електрически ток. Всяко преминаване на клетка е придружено от появата електрически импулс. За да разберете каква е клетъчната концентрация, е необходимо да прекарате определен обем проба през канала и да преброите броя на импулсите, които се появяват. Единственото ограничение е, че концентрацията на пробата трябва да гарантира, че само една клетка преминава през отвора наведнъж.



Технологията за автоматизиран хематологичен анализ измина дълъг път през последните 60 години. Първоначално това бяха прости клетъчни броячи, които определяха 8-10 параметъра: брой на червените кръвни клетки (RBC), брой на белите кръвни клетки (WBC), хемоглобин (Hb) и няколко изчислени. Това бяха анализаторите първи клас.

Втора класаВече съм идентифицирал до 20 анализатора различни параметрикръв. Те са значително по-високи в нивото на диференциация на левкоцитите и са в състояние да изолират популации от гранулоцити (еозинофили + неутрофили + базофили), лимфоцити и интегрална популация от средни клетки, която включва моноцити, еозинофили, базофили и плазмени клетки. Тази диференциация на левкоцитите се използва успешно при изследването на практика здрави хора.

Най-технологично напредналите и иновативни анализатори днес са машините трети клас, които определят до стотици различни параметри, извършват детайлна диференциация на клетките, включително по степен на зрялост, анализират тяхната морфология и сигнализират на лаборанта за откриване на патология. Автомобилите от трета класа, като правило, също са оборудвани автоматични системиприготвяне на петна (включително тяхното оцветяване) и показване на изображението на екрана на монитора. Тези усъвършенствани хематологични системи включват по-специално оборудването на BeckmanCoulter система за клетъчен анализ UniCel DxH 800.



Съвременните устройства на BeckmanCoulter използват мултипараметрична поточна цитометрия, базирана на патентована технология VCS (Volume-Conductivity-Scatter). VCS технологията включва оценка на обема на клетката, нейната електрическа проводимост и разсейване на светлината.

Първият параметър, обемът на клетката, се измерва с помощта на принципа на Coulter, базиран на оценка на съпротивлението, когато клетката преминава през отвор при DC. Размерът и плътността на клетъчното ядро, както и вътрешният му състав се определят чрез измерване на неговата електрическа проводимост в променлив токвисока честота. Разсейването на лазерната светлина под различни ъгли позволява да се получи информация за структурата на клетъчната повърхност, грануларността на цитоплазмата и морфологията на клетъчното ядро.

Данните, получени от три канала, се комбинират и анализират. В резултат на това клетките се разпределят в клъстери, включително разделяне според степента на зрялост на червени кръвни клетки и левкоцити (неутрофили). Въз основа на получените измервания на тези три измерения се определят множество хематологични параметри - до 30 за диагностични цели, над 20 за изследователски цели и повече от сто специфични изчислителни параметъра за високоспециализирани цитологични изследвания. Данните се визуализират в 2D и 3D формати. Лабораторен техник, работещ с хематологичен анализатор BackmanCoulter, вижда резултатите от анализа на монитора, изглеждащи по следния начин:



И тогава той решава дали трябва да бъдат проверени или не.

Излишно е да казваме, че информационното съдържание и точността на съвременния автоматичен анализ е в пъти по-високо от ръчния? Производителността на машините от този клас е около сто проби на час при анализ на хиляди клетки в проба. Нека припомним, че по време на микроскопия на цитонамазка лекарят анализира само 100 клетки!

Но въпреки тези впечатляващи резултати, микроскопията все още остава „златен стандарт“ за диагностика. По-специално, когато апаратът открие патологична клетъчна морфология, пробата се анализира ръчно под микроскоп. При изследване на пациенти с хематологични заболявания микроскопията на оцветена кръвна натривка се извършва само ръчно от опитен хематолог. Точно така, ръчно, в допълнение към автоматичното преброяване на клетките, се оценява левкоцитната формула във всички кръвни тестове на деца според поръчки, направени чрез онлайн лабораторната услуга LAB4U.RU.

Вместо автобиография

Технологиите за автоматизиран хематологичен анализ продължават да се развиват бързо. По същество те вече са заменили микроскопията в рутинните превантивни тестове, оставяйки я за особено важни ситуации. Имаме предвид детски изследвания, изследвания на хора с потвърдени заболявания, особено хематологични. Въпреки това, в обозримо бъдеще в тази област на лабораторната диагностика лекарите ще получат устройства, способни самостоятелно да извършват морфологичен анализ на клетки с помощта на невронни мрежи. Като намалят тежестта върху лекарите, те същевременно ще повишат изискванията към тяхната квалификация, тъй като в зоната на вземане на решения от човека ще останат само атипични и патологични клетъчни състояния.

Броят на информативните параметри на кръвния анализ, който се е увеличил многократно, повишава изискванията за професионална квалификация и за клинициста, който трябва да анализира комбинации от стойности на маса от параметри за диагностични цели. В този случай на помощ на лекарите идват експертни системи, които, използвайки данни от анализатора, дават препоръки за по-нататъшно изследване на пациента и дават възможна диагноза. Такива системи вече се предлагат на лабораторния пазар. Но това е тема за отделна статия.

Тагове: Добавете тагове

Публикации по темата