Човешка кръв под микроскоп. Микроскопия в различни области на приложение

Признаци на бременност след имплантиране на ембрион

Много е трудно да се отрече значението на науката в живота на цялото общество. Учените и техните разработки са дали на обществото всичко, на което то сега се радва и радва. Разработките на учени в различни области позволяват да се победят смъртоносните болести, да се борят срещу психични разстройства, създават уникално „умно“ оборудване и дори роботи. Възможностите на науката са наистина безкрайни. Новите лица винаги носят нови идеи със себе си, които стават основа за бъдещо развитие. Въпреки това, много разработки се основават на прости и доказани методи.

Мишките бяха рандомизирани на групи. Три до шест повторения бяха събрани на експериментална група. Степента на чистота е 3%-7%. За оцветяване с вътреклетъчни цитокини клетките се стимулират в продължение на 5 часа с фалбол миристат ацетат и йономицин в присъствието на брефелдин А през последните 4 часа. За оцветяване с цитокини клетките се стимулират в продължение на 4 часа с фромбол миристат ацетат и йономицин в присъствието на брефелдин А през последните 2 часа.

След това ямките бяха фиксирани и пермеабилизирани съгласно инструкциите на производителя. Фиксирането и оцветяването се извършват съгласно инструкциите на производителя. Всички инжекции бяха извършени при липса на анестезия и аналгезия и мишките бяха незабавно върнати в домашните им клетки в съответствие с процедурата. Ежегодно се наблюдава хуманното отношение към опитните животни. По време на тези експерименти не са отбелязани неочаквани нежелани събития.

Много мъдреци от миналото казаха, че има макро-, микрокосмос. На този етап на развитие хората не можеха да осъзнаят цялата дълбочина на тези думи. В крайна сметка макро- и микрокосмосът наистина съществуват и си взаимодействат много тясно. Могат да бъдат причинени малки промени в клетъчната структура глобални променив слънчева система. Към днешна дата е много трудно да се докаже или отхвърли такава връзка, но изследванията на света на бактериите и клетките показват, че клетката е малка Вселена.

Имунофлуоресцентно оцветяване и конфокална микроскопия. Т. също замръзват в изпарения на течен азот. Изображенията са заснети чрез конфокална микроскопия. Статистическата значимост беше оценена с помощта на теста на Mann-Whitney. Сдвоените данни бяха анализирани с помощта на двустранен сдвоен t-тест на Student. Експериментите с моаре са проведени в съответствие със съответния проект на Министерството на вътрешните работи и лични лицензи след институционално етично одобрение. Беше получено информирано съгласие от всички участници и проучването беше одобрено от Националния комитет по етика на научните изследвания.

Микроскопия

Микроскопията е наука за използването на микроскоп. В превод от гръцки тази дума означава "малък, малък". Микроскопията може да бъде разделена на няколко подвида: оптична, многофотонна, рентгенова, лазерна и електронна. Целта на този метод на изследване е да увеличи наблюдателността на обекта и регистрирането на забелязаните промени.

Конфликт на интереси: Авторите декларират, че няма конфликт на интереси. Нивата на кръвната захар се контролират строго от координираното действие на поне четири вида клетки, които изграждат островите на панкреаса. Освен това, това проучване показа, че делта клетките специфично експресират рецептори, които получават и координират системни сигнали от лептин, грелин и допаминови сигнални пътища, които ги предполагат като интегратори на централни и периферни метаболитни сигнали в панкреасния остров.

История на микроскопа

В началото на неговата историческо развитиемикроскопите са тези, които използват видими светлинни лъчи. Такива устройства бяха много слаби за наблюдение и бяха подходящи само за най-простите операции. Идеята за появата на електронен микроскоп възникна в момента, когато учените мислеха за замяната на електромагнитното излъчване с електронен лъч. Това събитие стана отправна точка за развитието на електронния микроскоп, който значително разшири възможностите за наблюдение на обект.

По този начин това проучване идентифицира основните характеристики на клетъчния тип на острата панкреатична функция и осигурява критичен ресурс за цялостно разбиране на биологията на островчетата и патогенезата на диабета. Лангерхансовите острови на панкреаса са групи от поне четири различни видовеендокринни клетки, които секретират хормони, които предизвикват координирани, но различни реакции за поддържане на глюкозната хомеостаза. Следователно те са централни за патофизиологията на диабета.

Микроскопски методи

За да се изследва правилно и задълбочено всеки обект, е необходимо да се работи по определен алгоритъм. Такива алгоритми се разработват веднъж и се използват с години. За да уча Светътс помощта на специално оборудване е необходимо да се овладеят специални методи. Методите на микроскопията са комбинация от различни алгоритми, следвайки които можете задълбочено и систематично да изследвате конкретен обект на микросвета. Преминаването на светлинен лъч през микроскоп е придружено от някои промени в първоначалните характеристики, които могат да бъдат причинени от структурната структура на обекта. Този процес може да бъде придружен от редица оптични ефекти като отражение, абсорбция, пречупване, дисперсия и др.

Съставът на човешките индивиди не е нито хомогенен, нито статичен, но варира между отделните индивиди и в различните области на панкреаса. Клетъчната хетерогенност усложнява молекулярните изследвания на цели човешки островчета и може да маскира важна роля за по-малко изобилните клетки в популацията. Освен това, това усложнява опитите за идентифициране на епигенетични и транскрипционни сигнатури, разграничаващи диабетните от недиабетните островчета, което води до непоследователни доклади за влияния на гени и пътища.

Конвенционалните методи за сортиране и обогатяване не са в състояние да пречистят специфично всеки тип островни клетки, така че няма точно разбиране на транскрипционния репертоар, който определя идентичността и функцията на всеки тип клетка. От тези профили ние идентифицирахме транскрипти, които са уникално важни за всяка личност и функция на всеки тип островни клетки. Данните и констатациите от това проучване са важна основа за насочване на бъдещо проучване, базирано на генома, за дисфункция на островчета и диабет.

Методи на светлинна микроскопия

Светлинната микроскопия е система от методи, които използват различни оптични ефекти за надеждно показване на резултатите. Видимите елементи и естеството на полученото изображение до голяма степен ще зависят от осветлението. Общо има голям бройметоди на микроскопия: светло поле, наклонено осветяване, интерферентен контраст, тъмно поле, поляризационен метод, фазов контраст, ултравиолетова, луминесцентна, инфрачервена микроскопия, конфокален микроскоп.

Едноклетъчните транскриптоми на Amber точно копират тези на непокътнати островчета

Панкреатични островчета са получени от осем човешки донори на трупни органи. Транскриптомите са групирани по донор, а не по състояние на лечение или време на инкубация, което силно показва, че обработката на островчетата не променя значително транскриптомите на островчетата.

Единичните клетъчни транскриптоми отразяват тези сдвоени непокътнати островчета. Схема на експерименталния работен процес. След това оценихме степента, до която останалите 978 едноверижни транскриптоми представляват модели на експресия, наблюдавани в непокътнати островчета. Тези резултати показват, че едноклетъчните островни транскриптоми са с високо качество и ефективно отразяват обемисти островни транскриптоми.

Всички тези методи имат определени предимства и недостатъци. При работа с извадка трябва да се избере един или друг метод въз основа на неговата адекватност в дадена ситуация. Силен и слаби странина всеки метод като цяло не са важни, основното е методът да е приложим при дадени условия.

Микроскопия и медицина

Използването на микроскопията в медицината има голям потенциал. Днес, благодарение на микроскопите, е възможно да се изследват различни клетки на човешкото тяло, за да се определи точно здравословното състояние. Клетките на тялото дават най-точния и надежден резултат, който доскоро беше невъзможно да се получи, тъй като микроскопите не можеха да предоставят изчерпателна информация.

Еднокамерното профилиране улавя транскриптоми на големи и второстепенни ендокринни и екзокринни типове клетки на панкреаса. Панкреасът също така съдържа три вида екзокринни клетки: ацинарни, звездовидни и протонни, които критично подпомагат храносмилането чрез синтеза и транспорта на храносмилателни ензими. Използвахме тези маркерни гени, за да определим представянето на всеки тип островни клетки сред нашите 978 профилирани единични клетки.

По този начин антителата срещу други потенциални маркери на клетъчната повърхност, които сме идентифицирали, могат да бъдат полезни за изчистване на други видове островни клетки. Профилирането на единичен елемент идентифицира неочаквано припокриване в експресията между малки и големи островни клетъчни типове. Техники за клетъчно сортиране и обогатяване, като флуоресцентно активирано клетъчно сортиране, са използвани за идентифициране на характерни алфа и бета клетъчни гени.

Използването на такива устройства е много обещаващо, тъй като методите на лечение и диагностика могат драстично да се променят и напълно да преминат на ново ниво. Микроскопското изследване е познато и прилагано дълго времеНауката обаче е на път да лекува човек с клетки. то уникална възможност, което ще ви позволи да се отдалечите от обичайните методи на лечение и да забравите за лекарствата. Клетката е най-мощният елемент в тялото. Просто е безсмислено да се говори за ползите от присаждането на здрави клетки на болен човек, защото това е очевидно.

Гените, лежащи в основата на метаболитната функция, регулирането на енергийната хомеостаза и ситостта, са специфични за различните видове островни клетки. Бета клетките регулират нивата на кръвната захар чрез секреция на инсулин и по този начин са изключително чувствителни към нивата на кръвната захар.

Стимулираната от глюкоза инсулинова секреция е свързана с универсални главни пътища на клетъчния метаболизъм в бета клетките. Специфична експресия на метаболитни, сигнални и специфични за диабетния клетъчен тип гени. Бета-клетъчна експресия на различни изоформи на гликолитични и метаболитни междинни продукти.

Анализ на урината

Общият анализ на урината е набор от мерки, насочени към изследване на свойствата на урината и нейния физико-химичен състав. Важни показатели в този случай са цвят, мирис, реакция, прозрачност, плътност, както и съдържанието в урината. различни вещества. Микроскопията на утайката на урината ви позволява да определите наличието на соли, клетъчни елементи и цилиндри. Трябва да се разбере, че урината е крайният продукт от дейността на бъбреците, който може много точно да отразява състоянието на метаболитните процеси и кръвта в тялото.

По този начин нашите данни предполагат интригуващи роли на островните делта клетки в интегрирането на метаболитни сигнали чрез сигнални пътища на лептин, грелин и допамин. Единичните клетъчни транскриптоми свързват редки и често срещани гени за генетичен риск от диабет с типовете островни клетки. Ние също така проучихме моделите на експресия на 536 гени от клетъчен тип, които определят количествените характеристики на локусите. Сто петдесет и девет допълнителни гена не показват повече от или равно на четирикратна промяна в експресията в който и да е тип ендокринни островни клетки.

Анализ на утайката на урината

Микроскопията на урината ви позволява да създадете по-пълна картина с пълно изследване на тялото. Също така, намазката често се използва за обичайна и диференциална диагноза на заболявания на пикочните пътища и бъбреците. По време на лечението може да се предпише микроскопия на урината, за да се оцени ефективността на намесата на лекаря. Анализът на урината ви позволява да идентифицирате специфични или потенциални проблеми във водния и електролитния баланс на тялото, както и в метаболитния процес. Анализът на урината е много ефективен при диагностицирането на заболявания стомашно-чревния тракт, както и при инфекциозни и възпалителни процеси в организма. Понякога микроскопията на урината се използва за наблюдение на състоянието на пациента в периода на терапевтично или хирургично лечение.

Последните проучвания показват характеристиките на дедиференциацията на бета клетките при условия на диабет и стрес. Неотдавнашни проучвания върху единично клетъчно островче възникнаха, докато проучването се проучваше. Степента на валидиране за делта клетките беше значително по-ниска, вероятно поради сравнително малкия брой клетки, профилирани за сравнение. В допълнение, тези подходи затрудняват откриването на експресия и промени в експресията на транскрипти с ниско съдържание. Въпреки тези ограничения, ние наблюдавахме силна корелация между сдвоени насипни островчета и транскрипти на единични клетки, което предполага, че те са висококачествени и представителни набори от данни.

Изследване на кръв под микроскоп

Кръвните клетки се образуват в червения костен мозък и след това се освобождават в кръвния поток. Всеки изпълнява своята специфична функция. Левкоцитите са необходими за борба с инфекциозните клетки, еритроцитите допринасят за обогатяването на клетките с кислород и отстраняването на въглероден диоксид от тях, тромбоцитите са много важни за хемостазата. При нормални условия човешкото тяло произвежда нормативна стойноствсички клетки, които не надхвърлят определени граници. В случай на усложнения или заболяване, кръвните клетки могат да променят своя размер, форма, цвят и количество. Само благодарение на точното микроскопско изследване е възможно да се определи състоянието на клетките и да се направят съответните заключения.

Въз основа на едноклетъчни профили на транскриптоми, ние идентифицирахме клетки от всеки ендокринен и екзокринен тип в агностичния панкреас и манипулирахме данните. Този подход дефинира изразните сигнатури на всеки тип клетка с точност до една клетка. Тези данни предполагат, че дисфункцията на делта клетките, в допълнение към дисфункцията на бета клетките, е потенциален фактор за развитието на моногенни диабетни разстройства.

Това ясно изисква допълнителна работаза по-добро разбиране на регулацията и функцията на тези клетки при нормални и диабетни състояния. Нови маркери на клетъчната повърхност, идентифицирани за всеки от тези типове клетки, могат да бъдат използвани за конкретно обогатяване и пречистване на тези популации за подробни функционален анализ.

Кръвта е животворната течност на тялото, която осигурява обмяната полезни веществамежду всички клетки. Микроскопията на кръвната натривка е изследване, извършвано под микроскоп. Изследва се препарат, приготвен от една капка кръв. Тази процедура е включена в общия кръвен тест или левкоцитната формула и не се извършва отделно.

Приготвяне, обработка и дисоциация на островчета

Тази разлика не беше толкова изразена, колкото в предишните доклади, вероятно поради сравнително скромния брой клетки, взети за всеки индивид. Двадесет и четири часа след прехвърлянето, приблизително 500 еквивалента островчета се разделят на аликвоти и се центрофугират при 180 g за 3 минути при стайна температура. Общо времеобработка и обработка за всеки остров е ≤60 min. Използвани са до два микрофлуидни чипа на островче за всеки препарат.

Съгласуваност, разчитане на картографиране и контрол на качеството

Обработка на една клетка и качествено филтриране

Класификация на типовете острови. От многото аспекти на алтернативната медицина един от най-странните е анализът на живи кръвни клетки. Този неоторизиран кръвен тест може да показва хранителни дефицити и други неясни състояния.

микроскопия на цитонамазка

За какво е кръвна натривка? Микроскопията на кръвна натривка дава на специалиста много важна информация за състоянието на човешкото здраве. С този анализ можете да определите количественото съотношение на червените кръвни клетки, тромбоцитите, белите кръвни клетки, както и тяхната форма и размер. В допълнение, той ви позволява да определите количествената експресия на незрели левкоцити, което е много важен моментпри редица заболявания. Също така кръвната намазка ви позволява да диагностицирате качествено заболявания, които могат да бъдат свързани с нарушена функция на кръвта, нейното образуване, съсирване и разрушаване, както и при левкемия.

Вземете просто научен фактили термин, изградете сложна фантазия върху него, прокарайте го напред и имате псевдонаука. Пример за това е анализът на жива кръв с помощта на тъмна микроскопия. Това звучи като легитимна и ценна диагностична процедура, основана на доказателства; не е.

Микроскопията в тъмно поле е микроскопска техника, при която светлината попада върху наблюдавания материал отстрани, а не отдолу и през материала. Фонът е тъмен, като наблюдаваният материал е подчертан от страничен източник на светлина. При нормална ярка микроскопия фонът е бял или много светъл и материалът обикновено се оцветява тъмен цвят, Придобивам малки частии цветове, които обикновено не се виждат.

Кръвна намазка се предписва, ако общият кръвен тест показва, че количествената експресия на левкоцити, незрели или атипични клетки се увеличава. За намазка можете да използвате биоматериал от кръв или капиляри.

Биология и микроскопи

Биологията значително разширява възможностите за използване на микроскопи. Както споменахме по-рано, цитологията разчита до голяма степен на модерни и мощни микроскопи. Микроскопията в биологията отваря безпрецедентен обхват за експерименти и изследвания за учените. Съвременните разработки вече ни позволяват да говорим какво ни очаква бъдещето.

В медицината най-често използваната ярка микроскопия е за диагностични цели. Конвенционалната пълна кръвна картина често се извършва частично с оцветени кръвни натривки на пациента, наблюдавани под ярка микроскопия. С тази техника учен от клинична лаборатория може да наблюдава много фини детайли за размера и формата на червените кръвни клетки; формата, размера и относителния брой на левкоцитите; и наличието или отсъствието на тромбоцити, онези малки клетъчни фрагменти, които причиняват съсирването на кръвта.

Полевата микроскопия е полезна в медицинската лаборатория за идентифициране на живи спирохети, събрани от заразен пациент. Това са подобни на тирбушон бактерии, които могат да се видят как се движат и пробиват през течността или материала, в който са окачени. Тъй като тъмното поле по дефиниция е тъмно, повечето от детайлите, които са очевидни, когато се разглеждат ярко, са невидими. Използването на тъмни методи при изследване на жива кръв за клетъчна форма и детайли е подозрително и не се препоръчва от повечето реномирани медицински лаборатории, тъй като има малка диагностична стойност.

Микроскопията в биологията има много широко приложение. Устройствата ни позволяват да изследваме организми, които са недостъпни за човешкото око, но са много важни за научни експерименти. В биологията най-често използваният метод е електронната микроскопия, която дава изображение благодарение на насочения поток от електрони. В същото време дори светлинният микроскоп дава възможност за изследване на живи биологични обекти.

Методът на микроскопията в биологията се използва много активно, тъй като почти всички разновидности са приложими за биологични изследвания. Интерференционната микроскопия ви позволява да изучавате прозрачни течности и предмети, както и да ги давате.Това е възможно поради факта, че светлинният лъч, преминаващ през устройството, се раздвоява: една част от него преминава през обекта, а другата част минава. Така двата лъча се намесват и комбинират, за да дадат цялостен образ.

Микроскопия в различни области на приложение

Обхватът на микроскопията е много широк. Въпреки факта, че първоначално микроскопите са били предназначени за изследвания в областта на биологията, днес тяхната сфера на влияние се е разширила значително. Микроскопията е набор от методи, намерили своето приложение в анализа на твърди и кристални тела, структурата и структурите на повърхностите. Микроскопите също се използват активно в медицината не само за диагностика, но и за извършване на микрохирургични операции. Освен това е известно, че учените са разработили подводен лазерен микроскоп, чиято цел е да търси извънземен живот в Европа.

Също така не трябва да забравяме за бързото развитие на нанотехнологиите, които са немислими без микроскопи. Развитието на тази индустрия води до факта, че различни микроустройства непрекъснато се подобряват. Освен това има нови, които са предназначени да изучават определена среда.

Обобщавайки някои резултати, трябва да се каже, че микроскопията е обещаваща област, която се развива все по-активно всяка година. Интересът към човешките стволови клетки, както и развитието на нанотехнологиите, водят до факта, че микроскопите стават неразделна част от всяка изследователска работа.

Пълната кръвна картина е най-честият диагностичен тест, който лекарят предписва на пациент. През последните десетилетия технологията на това рутинно, но много информативно изследване направи огромен скок - стана автоматично. На помощ на лекаря по лабораторна диагностика се притекоха високотехнологични автоматични хематологични анализатори, чийто инструмент беше обикновен светлинен микроскоп.

В тази публикация ще ви кажем какво точно се случва вътре в „умната машина“, която вижда през кръвта ни, и защо трябва да й се вярва. Ще разгледаме физиката на процесите, използвайки примера хематологичен анализатор UniCel DxH800глобална марка Beckman Coulter. Именно на това оборудване се извършват изследвания, поръчани от услугата за лабораторна диагностика LAB4U.RU. Но за да разберем технологията на автоматичния анализ на кръвта, ще разгледаме какво са видели лабораторните лекари под микроскоп и как са интерпретирали тази информация.

Параметри на кръвния тест

И така, в кръвта има три вида клетки:
  • левкоцити, които осигуряват имунна защита;
  • тромбоцити, отговорни за съсирването на кръвта;
  • еритроцити, които пренасят кислород и въглероден диоксид.
Тези клетки се намират в кръвта в много специфични количества. Те се определят от възрастта на човека и здравословното му състояние. В зависимост от условията, в които се намира тялото, костният мозък произвежда толкова клетки, колкото са необходими на тялото. Следователно, знаейки количеството определен видкръвните клетки и тяхната форма, размер и други качествени характеристики, можете уверено да прецените състоянието и текущите нужди на тялото. Това са ключовите параметри брой клетки от всеки тип външен види качествени характеристики- направете общ клиничен кръвен тест.


При провеждане общ анализкръвна броене на броя на еритроцитите, тромбоцитите и левкоцитите. По-трудно е с левкоцитите: има няколко вида от тях и всеки тип изпълнява своя собствена функция. Разпределете 5 различни видовелевкоцити:
  1. неутрофили, които неутрализират главно бактериите;
  2. еозинофили, които неутрализират имунните комплекси антиген-антитяло;
  3. базофили, участващи в алергични реакции;
  4. моноцитите са основните макрофаги и утилизатори;
  5. лимфоцити, осигуряващи общ и локален имунитет.
От своя страна, според степента на зрялост, неутрофилите се разделят на:
  • намушкам,
  • сегментиран,
  • миелоцити,
  • метамиелоцити.
Процентът на всеки вид левкоцити в общия им обем се нарича левкоцитна формула, която има голяма диагностична стойност. Например, колкото по-изразен е бактериалният възпалителен процес, толкова повече неутрофили са в левкоцитната формула. Наличието на неутрофили с различна степен на зрялост показва тежестта на бактериалната инфекция. Колкото по-остър е процесът, толкова повече пробождащи неутрофили са в кръвта. Появата на метамиелоцити и миелоцити в кръвта показва изключително тежка бактериална инфекция. Вирусните заболявания се характеризират с повишаване на лимфоцитите, с алергични реакции - повишаване на еозинофилите.

Освен количествените показатели изключително важна е клетъчната морфология. Промяната в обичайната им форма и размер също показва наличието на определени патологични процеси в организма.

Важен и най-известен показател е количеството хемоглобин в кръвта - сложен протеин, който осигурява доставянето на кислород в тъканите и отстраняването на въглероден диоксид. Концентрацията на хемоглобин в кръвта основен показателпри диагностицирането на анемия.

Друг важен параметър е скоростта на утаяване на еритроцитите (СУЕ). При възпалителни процеси червените кръвни клетки са склонни да се слепват една с друга, образувайки малки съсиреци. Притежавайки по-голяма маса, аглутинираните еритроцити се утаяват по-бързо под действието на гравитацията, отколкото единичните клетки. Изменението на скоростта им на утаяване в mm/h е прост индикаторвъзпалителни процеси в организма.

Как беше: скарификатор, епруветки и микроскоп

Вземане на кръв



Нека си спомним как се даряваше кръв преди: болезнено пробиване на малка възглавничка със скарификатор, безкрайни стъклени тръби, в които се събираха ценни капки изцедена кръв. Като лаборант с едната чаша очерта другата, където имаше капка кръв, като надраска цифрата на стъклото с обикновен молив. И безкрайни епруветки с различни течности. Сега изглежда като някаква алхимия.

Кръвта е взета от безименен пръст, за което имаше доста сериозни причини: анатомията на този пръст е такава, че нараняването му създава минимална заплаха от сепсис в случай на инфекция на раната. Вземането на кръв от вената се смяташе за много по-опасно. Затова анализът на венозната кръв не беше рутинен, а се предписваше при необходимост и то главно в болниците.

Трябва да се отбележи, че значителните грешки започнаха още на етапа на вземане на проби. Например, различната дебелина на кожата дава различна дълбочина на инжектиране, тъканната течност е попаднала в епруветката заедно с кръвта - оттук и промяната в концентрацията в кръвта, освен това при натиск върху пръста кръвните клетки могат да бъдат унищожени.

Помните ли реда от епруветки, където беше поставена кръвта, събрана от пръста? За броене различни клеткинаистина имаха нужда от различни епруветки. За еритроцити - с физиологичен разтвор, за левкоцити - с разтвор на оцетна киселина, където еритроцитите са разтворени, за определяне на хемоглобин - с разтвор на солна киселина. За определяне на ESR се използва отделен капиляр. И на последния етап беше направено намазка върху стъклото за последващо преброяване левкоцитна формула.

Кръвен тест под микроскоп

За преброяване на клетки под микроскоп в лабораторна практика, специално оптичен инструмент, предложен още през 19 век от руски лекар, на когото е кръстен този уред - камерата Горяев. Той дава възможност да се определи броят на клетките в даден микрообем течност и представлява дебело предметно стъкло с правоъгълна вдлъбнатина (камера). Върху него е нанесена микроскопична решетка. Отгоре камерата на Горяев беше покрита с тънко покривно стъкло.

Тази мрежа се състоеше от 225 големи квадрата, 25 от които бяха разделени на 16 малки квадрата. Еритроцитите се преброяват в малки набраздени квадратчета, разположени диагонално през камерата на Goryaev. Освен това имаше определено правило за преброяване на клетки, които лежат на границата на квадрата. Изчисляването на броя на еритроцитите на литър кръв се извършва по формулата, базирана на разреждането на кръвта и броя на квадратите в решетката. След математически редукции беше достатъчно преброеният брой клетки в камерата да се умножи по 10 на 12-та степен и да се въведе във формуляра за анализ.

Тук бяха преброени левкоцитите, но вече бяха използвани големи квадратчета, тъй като левкоцитите са хиляда пъти по-големи от еритроцитите. След преброяване на левкоцитите броят им се умножава по 10 на 9-та степен и се въвежда във формуляра. За опитен лаборант преброяването на клетките отне средно 3-5 минути.

Методите за преброяване на тромбоцитите в камерата на Горяев бяха много трудоемки поради малкия размер на този тип клетки. Техният брой трябваше да се определи само на базата на оцветена кръвна натривка, а самият процес също беше много трудоемък. Следователно, като правило, броят на тромбоцитите се изчислява само по специално искане на лекаря.

Левкоцитна формула, тоест процентният състав на левкоцитите от всеки тип в общия им брой може да се определи само от лекар - въз основа на резултатите от изследването на кръвни петна върху очила.



Визуално идентифициране на тези в зрителното поле различни видовелевкоцитите според формата на ядрото им, лекарят преброи клетките от всеки тип и общия им брой. След като преброи общо 100, той получи необходимото процентвсеки тип клетка. За да се опрости броенето, бяха използвани специални броячи с отделни ключове за всеки тип клетка.

Трябва да се отбележи, че такъв важен параметър като хемоглобина се определя от лаборанта визуално (!) По цвета на хемолизираната кръв в епруветка с солна киселина. Методът се основава на превръщането на хемоглобина в хематин хидрохлорид кафяв цвят, чийто интензитет на цвета е пропорционален на съдържанието на хемоглобин. Полученият разтвор на хематин на солна киселина се разрежда с вода до цвета на стандарта, съответстващ на известната концентрация на хемоглобин. Като цяло миналия век

Как стана: вакуумни контейнери и хематологични анализатори

Нека започнем с факта, че сега технологията за вземане на кръвни проби е напълно променена. Скарификаторите и стъклените капиляри с епруветки бяха заменени с вакуумни контейнери. Използваните в момента системи за вземане на кръв са по-малко травматични, процесът е напълно унифициран, което значително намалява процента на грешки на този етап. Вакуумните епруветки, съдържащи консерванти и антикоагуланти, позволяват съхранението и транспортирането на кръвта от мястото на вземане до лабораторията. Това е благодарение на появата нова технологиястана възможно да се правят тестове възможно най-удобно - по всяко време и на всяко място.



На пръв поглед изглежда невъзможно да се автоматизира такъв сложен процес като идентифицирането на кръвните клетки и тяхното преброяване. Но, както обикновено, всичко гениално е просто. Автоматичният кръвен тест се основава на фундаментални физични закони. Технологията за автоматично броене на клетки е патентована през 1953 г. от американците Джоузеф и Уолъс Култърс. Именно тяхното име стои в името на световната марка хематологична апаратура Beckman & Coulter.

Броят на клетките

Апертурно-импедансният метод (методът на Коултър или кондуктометричният метод) се основава на преброяване на броя и характера на импулсите, които възникват, когато клетката премине през отвор с малък диаметър (апертура), от двете страни на който има два електрода. . Когато една клетка преминава през канал, пълен с електролит, съпротивлението се увеличава. електрически ток. Всяко преминаване на клетката е придружено от външния вид електрически импулс. За да разберете каква е концентрацията на клетките, е необходимо да прекарате определен обем от пробата през канала и да преброите броя на импулсите, които се появяват. Единственото ограничение е, че концентрацията на пробата трябва да гарантира, че само една клетка преминава през отвора наведнъж.



През последните 60 години технологията за автоматизиран хематологичен анализ измина дълъг път. Първоначално това бяха прости клетъчни броячи, които определяха 8-10 параметъра: броя на еритроцитите (RBC), броя на левкоцитите (WBC), хемоглобина (Hb) и няколко изчислени. Това бяха анализаторите. първи клас.

Втори класАнализаторите вече са определили до 20 различни опциикръв. Те са значително по-високи в нивото на диференциация на левкоцитите и са в състояние да изолират популации от гранулоцити (еозинофили + неутрофили + базофили), лимфоцити и интегрална популация от средни клетки, която включва моноцити, еозинофили, базофили и плазмени клетки. Тази диференциация на левкоцитите се използва успешно при изследването на практика здрави хора.

Най-технологично напредналите и иновативни анализатори днес са машините трети клас, които определят до сто различни параметъра, провеждат детайлна диференциация на клетките, включително степента на зрялост, анализират тяхната морфология и сигнализират на лаборанта за откриване на патология. Автомобилите от трети клас, като правило, също са оборудвани с автоматични системиподготовка на намазки (включително тяхното оцветяване) и показване на изображението на екрана на монитора. Тези модерни хематологични системи включват оборудване на BeckmanCoulter, като напр система за клетъчен анализ UniCel DxH 800.



Съвременните апарати BeckmanCoulter използват метода на многопараметричната поточна цитометрия, базиран на патентованата технология VCS (Volume-Conductivity-Scatter). VCS-технологията включва оценка на обема на клетката, нейната електропроводимост и разсейване на светлината.

Първият параметър, обемът на клетката, се измерва с помощта на принципа на Coulter въз основа на оценката на съпротивлението, когато клетката преминава през отвора при DC. Размерът и плътността на клетъчното ядро, както и вътрешният му състав, се определят чрез измерване на неговата електрическа проводимост в променлив токвисока честота. Разсейването на лазерна светлина под различни ъгли предоставя информация за структурата на клетъчната повърхност, грануларността на цитоплазмата и морфологията на клетъчното ядро.

Данните, получени от трите канала, се комбинират и анализират. В резултат на това клетките се разпределят в клъстери, включително разделяне според степента на зрялост на еритроцити и левкоцити (неутрофили). Въз основа на получените измервания на тези три измерения се определят множество хематологични параметри - до 30 за диагностични цели, над 20 за изследователски цели и повече от сто специфични изчислителни параметри за високоспециализирани цитологични изследвания. Данните се визуализират в 2D и 3D формати. Лаборант, работещ с хематологичен анализатор BackmanCoulter, вижда резултатите от анализа на монитора в приблизително следната форма:



И след това решава дали трябва да бъдат проверени или не.

Излишно е да казваме, че информационното съдържание и точността на съвременния автоматичен анализ са в пъти по-високи от ръчните? Производителността на машините от този клас е около сто проби на час при анализ на хиляди клетки в проба. Припомнете си, че по време на микроскопията на цитонамазка лекар анализира само 100 клетки!

Но въпреки тези впечатляващи резултати, микроскопията все още остава „златният стандарт“ на диагностиката. По-специално, когато апаратът открие патологична клетъчна морфология, пробата се анализира ръчно под микроскоп. При изследване на пациенти с хематологични заболявания микроскопията на оцветена кръвна натривка се извършва само ръчно от опитен хематолог. Ето как ръчно, в допълнение към автоматичното преброяване на клетките, се оценява левкоцитната формула във всички кръвни тестове на деца по поръчки, направени чрез лабораторната онлайн услуга LAB4U.RU.

Вместо автобиография

Технологиите за автоматизиран хематологичен анализ продължават да се развиват бързо. По същество те вече са заменили микроскопията при извършването на рутинни профилактични изследвания, оставяйки я за особено важни ситуации. Имаме предвид изследвания за деца, изследвания за хора с потвърдени заболявания, особено хематологични. Въпреки това, в обозримо бъдеще, дори и в тази област на лабораторната диагностика, лекарите ще получат устройства, способни самостоятелно да извършват морфологичен анализ на клетки с помощта на невронни мрежи. Като намалят натоварването на лекарите, те същевременно ще повишат изискванията към тяхната квалификация, тъй като в зоната на вземане на решения ще останат само атипични и патологични клетъчни състояния.

Броят на информативните параметри на кръвния тест, който се е увеличил многократно, повишава изискванията за професионална квалификация и клиницист, който трябва да анализира комбинации от стойности на масата на параметрите за диагностични цели. Лекарите от този фронт се подпомагат от експертни системи, които, използвайки данните от анализатора, дават препоръки за по-нататъшно изследване на пациента и издават възможна диагноза. Такива системи вече са на лабораторния пазар. Но това е тема за отделна статия.

Тагове: Добавете тагове

Свързани публикации